“昊创新、好技术！”
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亚硫酸氢盐处理后测序法（bisulfite sequencing PCR，BSP）是检测基因DNA甲基化修饰的经典方法，其原理为：用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶（C）被转化为尿嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶则不变。基因组DNA经亚硫酸氢盐处理后，设计BSP引物扩增目的片段，PCR扩增后尿嘧啶（U）全部转化为胸腺嘧啶（T），后对PCR产物进行Sanger测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。
样品需求量：Qubit检测，要求浓度≥ 20 ng/μL，总量≥ 1 μg（10个反应）
样本纯度：无色透明，OD260/280 = 1.8~2.0；OD260/230≥ 2.0
样品完整度：琼脂糖电泳检测要求主条带清晰，无明显弥撒及拖尾，无RNA及蛋白污染
样品保存和运输要求：-20°C保存，冰袋运输
图 BSP甲基化Sanger测序结果
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